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細菌濃度測定,為何選擇OD600?

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2025-09-24
核心提示:一、OD與吸光度的關系吸光度和透光率在光譜學中是經常使用到的兩個術語。吸光度(Absorbance,簡寫Abs或A),常用A表示,是指光束

一、OD與吸光度的關系

吸光度透光率在光譜學中是經常使用到的兩個術語。

吸光度(Absorbance,簡寫Abs或A),常用A表示,是指光束通過被測樣品時,被測樣品對光的吸收量

透光率(Transmittance,縮寫Tra或T),常用T%表示,相對吸光度說的,是指光束通過被測樣品時,有一部分光被樣品吸收,穿透過的光的強度(P)和入射光的強度(P0)比值就是透光率,那么T=P/P0。

有人可能要問了,是不是A+P=P0,不是的,入射光中也有一部分因反射和散射而丟失的能量,那部分不在我們考慮范圍內。

吸光度和透光率的關系用公式表示為:

微信圖片_20250924142814

其中,A是吸光度,T是透光率。

從公式中可以看出,吸光度和透光率是一一對應關系,吸光度越高,那么透光率越低,反之,吸光度越低,透光率越高。

OD呢?

OD(optical density,縮寫為OD),稱光密度,此時也就是吸光度,在實際應用中,因為吸光度是物質對光的吸收量,習慣性用吸光度表達。所以,此時OD就是上述公式中的A。


三、為什么是600nm,不是500nm和700nm?

OD600是指將分光光度計的波長設定為600nm時,測定的光密度值,是微生物發(fā)酵過程中常用的生物量測定方法之一,可以間接反映發(fā)酵液菌體濃度。OD600越高,菌液中細胞數量越多,反之,細胞數量越少。

那么,為什么要將分光光度計的波長設定為600nm來測定微生物發(fā)酵液中的OD值呢?

分光光度計在波長600nm處對濁度的反應比較靈敏,所以,一般用波長600nm測定。


四、OD600可以測菌液濃度?

OD600正比于菌液濃度,OD值越高菌液濃度越高,OD值越低菌液濃度越低,他們成關系正相關,而不是線性關系。

在平常試驗中,我們總想復雜問題簡單化,簡單問題更簡單化,其實OD值和菌液濃度的關系一直也是比較關注的一個焦點,為什么呢?

因為測OD值只需要用分光光度法度數就行,最多稀釋個倍數,不用一分鐘肯定出結果,但菌液濃度可不一樣,菌液濃度是指一定體積內某生物細胞或個體的數量,也就是活菌數(CFU/mL,菌落形成單位/mL),如何測定?

總之,沒一個簡單的。相對來說,血球計數板計數最簡單,但也比測OD值麻煩。

有問題請關注食品微生物公眾號然后后臺留言,一起學習。

編輯:songjiajie2010

 
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