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無菌操作常見誤區(qū)與糾正指南

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2025-09-24
核心提示: 無菌操作常見誤區(qū)與糾正指南無菌操作是微生物實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞培養(yǎng)等工作的基石?此坪(jiǎn)單的操作背后,卻隱藏著許多容易忽視的誤
 


無菌操作常見誤區(qū)與糾正指南



無菌操作是微生物實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞培養(yǎng)等工作的基石?此坪(jiǎn)單的操作背后,卻隱藏著許多容易忽視的誤區(qū)。


在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中,一次微小的污染事件便足以導(dǎo)致長(zhǎng)達(dá)數(shù)周的實(shí)驗(yàn)工作前功盡棄。無論是珍貴細(xì)胞系被真菌污染而喪失活性,還是關(guān)鍵微生物實(shí)驗(yàn)因雜菌侵入而宣告失敗,均凸顯出無菌操作技術(shù)在保障實(shí)驗(yàn)成功中的核心地位。熟練掌握規(guī)范的無菌操作,不僅是一項(xiàng)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)技能,更體現(xiàn)了科研人員嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度與專業(yè)的實(shí)驗(yàn)素養(yǎng)。


常見誤區(qū)與糾正指南


1

乙醇消毒:萬能抑或局限?


❌ 錯(cuò)誤認(rèn)知:

在實(shí)驗(yàn)操作中,一種普遍存在的誤解是認(rèn)為僅依靠酒精棉球?qū)κ植炕蚺_(tái)面進(jìn)行擦拭即可實(shí)現(xiàn)有效去污,甚至將乙醇溶液視作可替代一切滅菌措施的“萬能解決方案”。這種觀念往往導(dǎo)致對(duì)實(shí)驗(yàn)器械及操作環(huán)境進(jìn)行徹底滅菌的忽視,從而埋下污染隱患。

✅ 糾正指南:

75%的酒精具有最佳的殺菌效果,但它只能表面消毒,無法達(dá)到滅菌要求(即殺死所有微生物包括芽孢)。對(duì)于手術(shù)器械、培養(yǎng)基、試管等,必須采用高壓蒸汽滅菌(121°C, 20-30分鐘)或干熱滅菌等物理方法。

📌 實(shí)用貼士:

酒精擦拭后,務(wù)必等待其自然風(fēng)干,揮發(fā)的過程才是殺菌的關(guān)鍵。切勿心急用嘴吹或用手扇。


2

無菌手套:物理屏障或潛在污染源?


❌ 錯(cuò)誤操作:

戴上無菌手套后,下意識(shí)地摸了摸頭發(fā)、調(diào)整了眼鏡、甚至接聽了電話……這些動(dòng)作都會(huì)讓手套瞬間從“無菌”變?yōu)椤坝芯薄?/span>

✅ 糾正指南:

 將手套視為你的“第二層皮膚”。它本身并不無菌,你的手在哪個(gè)位置,手套就在哪個(gè)位置被污染。一旦觸摸了非無菌區(qū)域,應(yīng)立即用75%酒精噴灑消毒或更換新手套。

📌 實(shí)用貼士:

在超凈臺(tái)內(nèi)準(zhǔn)備一個(gè)小型免洗消毒液瓶,隨時(shí)對(duì)手套進(jìn)行消毒。操作時(shí),手臂盡量不要離開臺(tái)面區(qū)域。


3

超凈工作臺(tái):相對(duì)潔凈而非絕對(duì)無菌


❌ 錯(cuò)誤操作:

在超凈臺(tái)內(nèi)擺放過多物品,操作時(shí)手臂頻繁穿梭,快速移動(dòng)產(chǎn)生氣流,甚至有人在臺(tái)內(nèi)大聲說話、咳嗽,這些都會(huì)破壞臺(tái)內(nèi)的單向流氣流,導(dǎo)致污染。

✅ 糾正指南:

1. 物品分區(qū):將臺(tái)面分為三區(qū)。清潔區(qū)(遠(yuǎn)離操作者的一側(cè))放置待使用的無菌物品;操作區(qū)(中間)進(jìn)行實(shí)驗(yàn);污染區(qū)(靠近操作者的一側(cè))放置廢棄物品。

2. 提前準(zhǔn)備:將所有所需物品一次性放入臺(tái)內(nèi),并經(jīng)過紫外線照射30分鐘后再開始操作。

3. 動(dòng)作輕柔:所有操作都應(yīng)緩慢、輕柔,避免擾亂氣流。


4

接種環(huán)燒一燒就夠了?


❌ 錯(cuò)誤操作:

將接種環(huán)在火焰外焰隨意晃兩下,沒有燒至通紅,或者灼燒后未冷卻就直接蘸取菌液,燙死了待操作的微生物。

✅ 糾正指南:

采用全程灼燒法:先將接種環(huán)(針)豎直插入火焰最底部的藍(lán)色內(nèi)核部分,直至整體燒紅,并保持3-5秒。然后,灼燒可能進(jìn)入試管的金屬桿部分。最后,在空氣中冷卻數(shù)秒(可靠近手背感知溫度,不燙即可),再進(jìn)行取樣。

📌 實(shí)用貼士:

灼燒后冷卻的接種環(huán)在放入菌液時(shí)不應(yīng)發(fā)出“滋”的聲音。


5

培養(yǎng)基暴露:規(guī)范操作與無菌控制


❌ 錯(cuò)誤操作:

打開培養(yǎng)皿或試管蓋后,長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中,或者將皿蓋完全取下、隨意放置。

✅ 糾正指南:

1.    培養(yǎng)皿:打開時(shí),應(yīng)將皿蓋開啟一個(gè)小于45°的縫隙,剛好足以完成劃線或涂布操作即可。操作完成后立即蓋好。

2.    試管/三角瓶:開啟后,瓶口應(yīng)迅速過火,利用氣流原理形成屏障,防止空氣中的雜菌落入。操作后同樣迅速過火并蓋緊。

📌 實(shí)用貼士:

暫時(shí)不用的已倒平板,可用封口膜或Parafilm封口膜密封邊緣,防止水分蒸發(fā)和污染。


無菌操作是一場(chǎng)與無處不在的微生物進(jìn)行的“隱形戰(zhàn)爭(zhēng)”。勝利的關(guān)鍵在于嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度、規(guī)范的操作和對(duì)細(xì)節(jié)的極致追求。記住,每一次成功的實(shí)驗(yàn)背后,都離不開無數(shù)個(gè)無菌操作的精準(zhǔn)瞬間。


編輯:songjiajie2010

 
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